معلومة

هل يلزم تثبيت مبلل لاستخدام زيت الغمر؟

هل يلزم تثبيت مبلل لاستخدام زيت الغمر؟


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

عندما أقوم بإعداد الشريحة الخاصة بي لاستخدام الزيت الغاطس ، هل أحتاج حقًا إلى تركيب العينة الرطبة؟ يمكنني أن أفعل ذلك فقط مع ساترة؟

أنا أقوم بتحضير جراثيم الفطريات.

يمنحك استخدام الماء للتركيب المبلل حدًا زمنيًا لنوع معين. عليك أن تقوم بعملك قبل أن يتبخر الماء وإلا ستحصل على أنهار صغيرة بسرعة x100.


عندما أقوم بإعداد الشريحة الخاصة بي لاستخدام الزيت الغاطس ، هل أحتاج حقًا إلى تركيب العينة الرطبة؟ يمكنني أن أفعل ذلك فقط مع ساترة؟

من الناحية المثالية ، لا يجب استخدام أي منهما مع زيت الغمر. يجب أن تتطابق مع فهرس الوسائط المتصاعدة قدر الإمكان مع مؤشر زيت الغمر ، وإلا ستقلل من دقة الصورة وتباينها. ارى:

http://www.microbehunter.com/the-importance-of-mounting-medium-refractive-index/

يمنحك استخدام الماء للتركيب المبلل حدًا زمنيًا لنوع معين. عليك أن تقوم بعملك قبل أن يتبخر الماء وإلا ستحصل على أنهار صغيرة بسرعة x100.

هناك الكثير من الخيارات لوسائط تركيب الفهرس الأعلى التي ستحافظ أيضًا على عينتك على الأقل وكذلك الهواء.


الجواب هو أنه لا يمكنك استخدام زيت الغمر دون تركيب الغطاء بالماء.

حاولت ذلك.

الماء جبل "الغراء" ساترة على الشريحة ، بشكل فعال ترسيخها في مكانها. بدون القيام بذلك ، عند إضافة زيت الغمر ، فإن الغطاء سوف ينزلق لأن الزيت "يمسك" بالغطاء. عندما تقوم بتحريك المسرح ، يتم لصق الغطاء على العدسة ويتم تحريك الشريحة الموجودة على المسرح ولكن الغطاء لا يتحرك لأنه ملتصق بالعدسة.

عندما تقوم بتركيب الغطاء بالماء ، يتم تثبيته بقوة بحيث يصعب فعلاً ذلك يدفع بأظافرك.

الخلاصة: لا زيت غاطس بدون حامل مائي!


14: استخدام المجهر

يعد المجهر ضروريًا للغاية لمختبر علم الأحياء الدقيقة: لا يمكن رؤية معظم الكائنات الحية الدقيقة بدون مساعدة المجهر ، باستثناء بعض الفطريات. وبالطبع ، هناك بعض الميكروبات التي لا يمكن رؤيتها حتى بالمجهر ، ما لم يكن مجهرًا إلكترونيًا ، مثل الفيروسات.

ستستخدم مجهرًا ضوئيًا مخصصًا لمجموعة متنوعة من التمارين المعملية خلال الفصل الدراسي ، كل شيء بدءًا من مشاهدة مياه البركة إلى تحديد البكتيريا غير المعروفة. لذلك ، من المهم للغاية أن تفهم كيفية استخدام المجهر بشكل فعال وكيفية استخدام أنواع مختلفة من الفحص المجهري ----برايتفيلد, تباين مرحلي، و حقل مظلم. يتم استخدام مجهر تباين الطور والحقل المظلم للتركيبات الرطبة ، في حين يمكن استخدام الحقل المضيء لكل من الحوامل الرطبة والعينات الملطخة.

ستحصل أيضًا على أول تعرض لك لتحضير مسحة بكتيرية وتلطيخها لاحقًا. ومع ذلك ، فأنت تقوم بعمل بقعة بسيطة باستخدام صبغة واحدة فقط. سيكون كل شيء على الشريحة بنفس اللون ، ولكن يمكنك التمييز بين أشكال البكتيريا وأحجامها وترتيباتها.


هل يلزم تثبيت مبلل لاستخدام زيت الغمر؟ - مادة الاحياء

يعد المجهر ضروريًا للغاية لمختبر علم الأحياء الدقيقة: لا يمكن رؤية معظم الكائنات الحية الدقيقة بدون مساعدة المجهر ، باستثناء بعض الفطريات. وبالطبع ، هناك بعض الميكروبات التي لا يمكن رؤيتها حتى بالمجهر ، ما لم يكن مجهرًا إلكترونيًا ، مثل الفيروسات.

ستستخدم مجهرًا ضوئيًا مخصصًا لمجموعة متنوعة من التمارين المعملية خلال الفصل الدراسي ، كل شيء بدءًا من مشاهدة مياه البركة إلى تحديد البكتيريا غير المعروفة. لذلك ، من المهم للغاية أن تفهم كيفية استخدام المجهر بشكل فعال وكيفية استخدام أنواع مختلفة من الفحص المجهري & # 8212-برايتفيلد, تباين مرحلي، و حقل مظلم. يتم استخدام مجهر تباين الطور والحقل المظلم للتركيبات الرطبة ، في حين يمكن استخدام الحقل المضيء لكل من الحوامل الرطبة والعينات الملطخة.

ستحصل أيضًا على أول تعرض لك لتحضير مسحة بكتيرية وتلطيخها لاحقًا. ومع ذلك ، فأنت تقوم بعمل بقعة بسيطة باستخدام صبغة واحدة فقط. سيكون كل شيء على الشريحة بنفس اللون ، ولكن يمكنك التمييز بين أشكال البكتيريا وأحجامها وترتيباتها.

المواد المطلوبة

  • مجهر
  • مياه البركة
  • شرائح المجهر
  • زلات الغطاء
  • قطارة الزيت
  • الشرائح المعدة من عصية
  • المسواك
  • مجموعات صبغ

الإجراءات

ألق نظرة على الأقسام الموضحة أدناه حول استخدام المجهر.

قم بإعداد جبل مبلل من ماء البركة (إن وجد)

  1. اذهب إلى الأسفل في الطحالب والوحل للحصول على عينة جيدة حقًا من البروتوزوا والطحالب إن أمكن.
  2. ركز على العينة باستخدام 10x ، ثم انتقل إلى 40X (ليس 100X). ابدأ بالحقل الساطع ، ثم انتقل إلى الحقل المظلم وتباين الطور (انظر التوجيهات أدناه).
  3. تدرب على المجهر وتغيير إعدادات المكثفات باستخدام عدسات مختلفة. ليس من المهم تحديد البروتوزوا أو الطحالب.

قم بإعداد مسحة وبقع بسيطة من المادة بين أسنانك.

  1. خذ مسواكًا معقمًا ، وقم بإزالة بعض المواد الصلبة بين أسنانك الحكيمة ، وامزجها في قطرة من الماء بحيث يكون لديك تعليق منتشر فوق الثلث الأوسط من شريحة المجهر. لم يتم استخدام انزلاق الغطاء!
  2. دع الانزلاق مجفف هواء.
  3. إصلاح الحرارة المسحة الجافة عن طريق تمرير الشريحة بسرعة عبر اللهب عدة مرات. إذا سخنت أصابعك ، فهذا يعني أن لديك حرارة ثابتة أكثر من اللازم.
  4. ضع الشريحة على السلك فوق صينية البقع. اغمر المسحة بالبنفسج الكريستالي: اتركها لمدة دقيقة واحدة.
  5. اغسل الشريحة جيدًا بالماء المقطر. امسح شريحة المسحة باستخدام الوسادة الورقية الماصة.
  6. ركز على العينة باستخدام العدسة 10x (تأكد من أنك في مجال الفحص المجهري): يجب أن ترى كتلًا من مادة أرجوانية ، معظمها صغير جدًا بحيث لا يمكن رؤيته.
  7. هل أنت مستعد للذهاب إلى 100X الآن؟ لاتفعل حرك المرحلة أو مقابض الضبط أمامك اتبع الإرشادات أدناه.
  8. تعرف على الأشكال والترتيبات المختلفة للبكتيريا في فمك. سيكون معظمهم على شكل عصية أو على شكل كوكوس ، ولكن لن يكون من غير المألوف رؤية بعض spirilla. لاحظ ترتيبات البكتيريا & # 8212 أزواج ، عناقيد ، سلاسل؟
  9. يتم إرجاع أي شريحة تستخدمها للمسحات إلى مربع الشرائح لتنظيفها واستخدامها مرة أخرى.

انظر إلى المسحات البكتيرية المعدة

  1. نظرًا لأنه تم شراء هذه اللطاخات الملطخة ، فإن زلات الغطاء عليها. ما زلت تستخدم الزيت عليها باستخدام عدسة مغمورة بالزيت.
  2. تأكد من إزالة أي زيت قبل استبدالها على الأدراج.

قبل وضع الانزلاق على مرحلة المجهر

  1. ابحث عن جميع الهياكل الموجودة على المجهر (الرسوم البيانية في نهاية التمرين) تأكد من أنك تعرف وظائفهم. قم بتدوير المكثف بحيث ترى جميع الإعدادات (الحروف البيضاء محفورة في مقدمة قرص المكثف). أيضًا ، حرك غشاء القزحية إلى اليسار واليمين حتى تتمكن من رؤية التأثير على كمية الضوء.
  2. ارفع ال مرحلة المكثف على طول الطريق. يوجد مقبض خاص لمرحلة المكثف تحت مسرح ميكانيكي. يجمع المكثف كل الضوء المتاح من المصباح ويوجهه إلى المسرح. لدينا دائمًا مرحلة المكثف الأقرب إلى المرحلة الميكانيكية عند مشاهدة الكائنات الحية الدقيقة. عند عرض أكبر الأشياء ، مثل الديدان أو الحشرات ، يمكنك تحريك المكثف لأسفل لتحسين كثافة الضوء التي تضرب العينة ، ولكن ليس للكائنات الدقيقة.
  3. أدر ال مقبض التحكم في السطوع على طول الطريق، ثم تراجع 1/4 دورة. هذا هو المكان الذي سيبقى فيه مقبض التحكم: لا تلمسه مرة أخرى. يتم التحكم في كمية الضوء الخارجة من خلال المكثف بواسطة قزحية الحجاب الحاجز.
  4. قم بتدوير ملف الأنف الدائر حتى ال عدسة موضوعية 10X منخفضة الطاقة يستقر في مكانه.
  5. قم بإحضار المرحلة إلى أعلى باستخدام ملف تعديل خشن مقبض الباب. راقب المسافة بين الشريحة والعدسة للتأكد من أنك لا تصطدم العدسة بالمرحلة.
  6. نظف جميع العدسات (العدسات العينية ، العدسات الموضوعية ، العدسة على المكثف) باستخدام عدسة الورق.
  7. اضبط العدسات العينية على المسافة الصحيحة لوجهك (يمكن تحريك العدسات أو التقريب معًا لتلبية احتياجاتك الخاصة). هؤلاء العدسة العينية العدسات كلاهما تكبير 10x.

لعرض عينة

  1. ضع الحامل المبلل أو اللطاخة على المسرح ، وقم بتثبيته داخل مقاطع مرحلة.
  2. حاول تخمين مكان وجود العينة على الشريحة ، ووضعها في وسط الفتحة للسماح للضوء بالمرور عبر المسرح.
  3. أثناء النظر من خلال العدسة العينية ، قم بخفض المسرح ببطء باستخدام مقبض الضبط الخشن. تأكد من أنك تنظر من خلال رأس مجهر المجهر بكلتا العينين.
  4. بمجرد رؤية العينة ، توقف عن استخدام الضبط الخشن ، وانتقل إلى مقبض الضبط الدقيق. بعد التركيز في البداية بمقبض الضبط الخشن ، لا يتم لمسه مرة أخرى. سيتم الآن إجراء كل التركيز باستخدام مقبض ضبط دقيق.
  5. تغيير الأهداف:

معظم أنظمة العدسات المجهرية برفوكال& # 8212 تتم محاذاة الأهداف بحيث يمكن إجراء الدوران إلى عدسة أخرى بدون تركيز بؤري كبير. قم بتدوير العدسة 40X في مكانها ، مع التأكد من استقرارها في مكانها. يجب أن تظل عينتك مرئية في مجال الرؤية ، ولكن أكبر بأربع مرات الآن. استخدم مقبض الضبط الدقيق لتوضيح الأشياء.

إذا كان مجال رؤيتك ضبابيًا ، ولم يكن هناك أي قدر من التركيز يبرز الهدف ، فمن المحتمل أن يكون لديك بقايا زيت على الهدف 40 مرة. يجب تنظيفه جيدًا باستخدام ورق العدسة.


العينات الموصى بها

أثناء عملك ، سجل ملاحظاتك بالملاحظات والرسومات والقياسات. لاحظ كيف أعددت كل شريحة ، وكيف حددت موقع كل عينة ولاحظتها ، وما هي مجموعات ضبط المكثف والعدسة الموضوعية التي عملت بشكل أفضل لكل غرض. لست مطالبًا بمراقبة جميع العينات. يتم تمييز المستحضرات المطلوبة بعلامة النجمة.

إدارة الوقت

خطط مسبقًا ، وتقدير مقدار الوقت الذي لديك لإعداد ومراقبة كل عينة. ضع خطة طوارئ في حالة عدم قدرتك على ملاحظتها جميعًا ، ووفر بعض الوقت (خمس دقائق أو نحو ذلك) لإنهاء دفتر الملاحظات. يعتمد جزء من تقدير الأداء على مدى كفاءة عملك ، بما في ذلك ما إذا كنت ستنتهي بحلول نهاية فترة المختبر المجدولة أم لا.


لماذا من المهم وضع ساترة فوق قطرة الماء عند تحضير حامل مبلل؟

عادة نحن وضع ال عينة في عدد قليل قطرات من الماء حتى لا يجف أثناء النظر إليه. ال ماء يساعد أيضًا الضوء على المرور عبر عينة أكثر بالتساوي. لحماية عينة في ال قطرات الماء على الشريحة ، يجب عليك تغطيتها بقطعة رقيقة جدًا من الزجاج تسمى ساترة.

قد يتساءل المرء أيضًا ، ما هي قيمة إعداد التثبيت الرطب؟ ما هي قيمة الرطب-إعداد جبل في المختبر السريري؟ ال قيمة الرطب-تتعدد الإعدادية في المختبر السريري هي القدرة على رؤية عينة حية والبحث عن الحركة ، والتي تساعد في تحديد هوية الكائن الحي.

تعرف أيضًا ، ما هو الغرض من التثبيت الرطب؟

لحماية عدسة المجهر من العينة ولتوفير سطح مستوٍ للعرض.

ما الفرق بين الحامل الرطب وإعداد الحامل الجاف؟

جبل جاف يعني وضع العينة مباشرة على الشريحة دون وضع الماء. جبل الرطب يعني وضع عينة في قطرة ماء على الشريحة ثم تغطيتها بغطاء.


حدود التكبير

يبلغ الحد الأقصى للتكبير المفيد للمجاهر حوالي 1000x-1200x نظرًا لحدود القوة المكبرة للضوء. عند نقطة معينة ، ستستمر الصورة في التكاثر كلما قمت بالتكبير ، لكن الدقة ستبقى بنفس الدرجة من السوء. لمعرفة المزيد حول التكبير ، انظر تكبير المجهر: شرح.

إذا كنت قد أشركت هدفك الأعلى من حيث القوة ولكنك غير قادر على التركيز عليه ، فعادةً ما يكون الهدف الأعلى للطاقة في المجهر هو هدف الغمر بالزيت 100X. هذه الأهداف هي أهداف متخصصة تتطلب الهدف أن يكون هناك قطرة من زيت الغمر بين العدسة الموضوعية وغطاء الشريحة فوق العينة الموجودة على الشريحة. لن تكون قادرًا على تركيز هذا الهدف بدون زيت الغمر. للحصول على دليل كامل حول كيفية استخدام زيت الغمر ولماذا تحتاج إلى زيت الغمر لإبراز شيء ما مع هذا الهدف ، راجع هذا المنشور.


ما هي المساعدة التي تحتاجها؟


كيف تستخدم المجهر بشكل صحيح! الحيل من التجارة التي كانت مصممة لتجعل حياتك أسهل!

بادئ ذي بدء ، لأن تكلفة المجهر بين 600 دولار و 800 دولار، فلنحاول اكتشاف بعض الطرق تجنب اضطراري لدفع الفاتورة أنت مقابل تكلفة استبدال واحد! يرجع جزء من التكلفة إلى التقدم المذهل الذي تم إحرازه في بنية المجهر الضوئي بمرور الوقت ، والذي لا يأخذ حتى المجاهر الإلكترونية في الاعتبار!

أجزاء المجهر النموذجي
انقر على الأجزاء لمزيد من المعلومات!

أصفر = تحذير

ملاحظة: قد تختلف بعض الألوان على المجهر الخاص بك.
تأكد من ملاحظة الألوان والتكبيرات الصحيحة بجوار الجدول أعلاه.

1.تأكد من أن جميع حقائب الظهر موجودة من الممرات قبل أن تحصل على المجهر! احمل دائمًا المجهر بيد واحدة على ذراع ويد واحدة على يتمركز. أحمله قريب من جسمك.
2.قم بإزالة الغطاء ، وقم بتوصيل المجهر ، ثم ضع السلك الزائد على الطاولة! إذا تركت السلك الزائد يتدلى فوق الحافة ، فقد تعلق ركبتك بها ، وسيكون الصوت التالي الذي تسمعه تحطم مكلفة للغاية. سوف أخصم لك لاحقا!

3. دائما تبدأ وتنتهي مع طاقة منخفضة! ال لون أخضر يعني يذهب! -تفضل ووضع الشريحة على المسرح ". "تفضل واستخدم مقبض التركيز البؤري الخشن. " "تفضل وإزالة الشريحة من المسرح ". "تفضل ووضع المجهر بعيدًا ".

ملاحظة: قد تختلف بعض الألوان على المجهر الخاص بك. اكتب اللون الصحيح بجانب الجملة أعلاه.

4.ضع الشريحة على مرحلة المجهر ، مع العينة مباشرة فوق المركز الدائرة الزجاجية على المسرح (مباشرة فوق الضوء). ثم لديك فرصة 9 من 10 للعثور على العينة بمجرد النظر من خلال العدسة!
ملاحظة:
إذا كنت ترتدي نظارات، خذهم إيقاف إذا كنت ترى فقط الخاص بك رموش العين، نقل أقرب. تأكد من أغلق، أو غطاء، يغطي لك آخر عين!!
ملاحظة: إذا رأيت ملف خط مظلم أن يذهب لدرجة معينة عبر ال مجال الرؤية، حاول قلب العدسة. هذا الخط المظلم هو المؤشر الذي سيكون قيمة جدا عندما تريد نشير شيء لك شريك المختبرأو الخاص بك معلم!

5.لو، وفقط إذا، كنت على طاقة منخفضة، قم بخفض العدسة الشيئية إلى أدنى نقطة، ثم ركز باستخدام المقبض الخشن أولاً ، ثم مقبض التركيز الدقيق. ستكون العينة موضع التركيز عندما يكون ملف قليل قوة الهدف قريب من أدنى نقطة, لذا ابدأ من هناك وركز على ببطء رفع العدسة. إذا لم تتمكن من الحصول عليها على الاطلاق إلى التركيز باستخدام المقبض الخشن ، ثم قم بالتبديل إلى مقبض التركيز الدقيق.
6.أضبط ال الحجاب الحاجز وأنت تنظر من خلال العدسةوسترى ذلك أكثر تظهر التفاصيل عندما تسمح بالدخول أقل ضوء! كثير جدا سيعطي الضوء العينة أ باهت، شاحبمظهر خارجي. حاول!!
7.بمجرد العثور على العينة على Low Power (100x) ، ما لم يكن سأل على وجه التحديد لرسمها على طاقة منخفضة ، المركز العينة في مجال رؤيتك ، دون تغيير مقابض التركيز ، قم بالتبديل إلى High Power. إذا لم تقم بتوسيط العينة ، فستفقدها عند التبديل إليها قوة عالية (أصفر). [أنظر فوق]

ملاحظة: قد تختلف بعض الألوان على المجهر الخاص بك. اكتب اللون الصحيح بجانب الجملة أعلاه.

8.بمجرد أن تحصل عليه قوة عالية تذكر أنك استخدم فقط مقبض التركيز الدقيق! ال أصفر يعني حذر! --تحذير ، استخدم فقط مقبض الضبط البؤري الدقيق. " "تنبيه ، لا تقم بإزالة الشريحة عندما تكون في وضع High Power." - - هدف القدرة العالية (430x) هو قريب جدا إلى الشريحة. إرادة استخدام مقبض التركيز الخشن خدش العدسة و كسر الشريحة. أكثر مكلفة اصوات . . .
9. لا تستخدم العدسة الحمراء مطلقًا. الأحمر يعني توقف !! - "قف! لا تستخدم تلك العدسة! " -- إنه ل عدسة الغمر الزيت. بدون زيت لتزييت العدسة ، ستفعل ذلك دمرها! أكثر مكلفة اصوات . . . أيضًا ، الزيت ضروري للمساعدة في جمع ما يكفي من الضوء للرؤية من خلال العدسة بالفعل!

ملاحظة: قد تختلف بعض الألوان على المجهر الخاص بك. اكتب اللون الصحيح بجانب الجملة أعلاه.

نصائح حول عمل رسومات جيدة:

1. لا تفكر حتى في بدء الرسم إلا إذا كان لديك ملف قلم! الرسومات في القلم غير مقبولة! هذا هو لسببين:
(أ) يمكنك محو قلم!
(ب) يمكنك الظل في المناطق بسهولة أكبر بالقلم الرصاص.
2. يجب أن يكون كل رسم 1/2 صفحة في الحجم و يجب أن تتضمن تسميات واضحة ومناسبة! في الزاوية العلوية اليسرى من كل دائرة ، قم بتضمين اسم العينة كما هو مكتوب على ملصق الشريحة. في الزاوية العلوية اليمنى ، قم بتضمين ملف التكبير (100x أو 430x).

3. يجب أن تبدأ التسميات من في الخارج من الدائرة. تشير الدائرة إلى مجال الرؤية كما يُرى من خلال العدسة. يجب أن تنتهي جميع الأسهم بـ ال نقطة لمس الكائن المراد تسميته!
4.يجب أن تكون الخلايا الحيوانية دائما يشمل على الاكثر الأتى خمسة ملصقات: غشاء الخلية ، الغشاء النووي ، النواة ، الكروماتين ، السيتوبلازم.
5.يجب أن تكون الخلايا النباتية دائما يشمل على الاكثر الأتى سبعة ملصقات: غشاء الخلية ، جدار الخلية ، الغشاء النووي ، النواة ، الكروماتين ، السيتوبلازم ، البلاستيدات الخضراء (هذا الأخير غير موجود في المؤكد زرع الخلايا).
6.تذكر: هذا الفصل حول روابط! لا أريدك أن تفعل بحث في الزنزانات التي أريدك أن تفعلها ارى معهم! من أجل القيام بذلك ، أنت يجب:

قم بتطبيق معرفتك بـ
زنزانة بنية لرسوماتك!
ان رسم غير مسمى ليس أكثر من
خدوش على قطعة من الورق!

تفحص ال تم تشغيل البرنامج التعليمي
النظر مقابل الرؤية!

1.اجمع a نحيف شريحة / قطعة مهما كانت عينتك. إذا كانت العينة الخاصة بك سميكة للغاية ، فإن الغطاء سوف يتمايل فوق العينة مثل أرجوحة:

2.مكان واحد قطرة ماء مباشرة العينة. إذا وضعت الكثير من الماء فوق العينة ، ثم تطفو الغطاء على سطح الماء ، مما يجعل من الصعب رسم العينات لأنها تطفو فوق مجال الرؤية!
3.ضع الغطاء بزاوية 45 درجة (تقريبًا) ، مع حافة واحدة تلامس قطرة الماء ، و اتركه.

1.ضع قطرة واحدة من الميثيلين الأزرق وصمة عار على حافة واحدة من ساترة ، والحافة المسطحة لقطعة من منشفة ورقية على الحافة الأخرى من ساترة. ستسحب المنشفة الورقية الماء من تحت الغطاء ، وتماسك الماء (بسبب تلك المفضلة الدائمة - هيدروجين سندات) سوف يرسم البقعة تحت الغطاء.

2.حالما وصمة عار غطت المنطقة التي تحتوي على العينة لقد انتهيت. وصمة عار ليس يجب أن تكون تحت غطاء كامل. إذا كانت البقعة لا تغطي المنطقة المطلوبة ، احصل على قطعة جديدة من المناديل الورقية وأضف المزيد من البقعة حتى يتم ذلك.
3.تأكد من امسح البقعة الزائدة بمنشفة ورقية ، حتى لا ينتهي بك الأمر بتلطيخ العدسات الموضوعية.
4.أنت الآن جاهز لوضع الشريحة على مرحلة المجهر. تأكد من اتباع جميع التعليمات الموجودة في الصفحات السابقة حول كيفية استخدام المجهر.
5.عندما تنتهي من رسوماتك ، تأكد من ذلك غسل والجافة على حد سواء الشريحة والغطاء وإعادتهم إلى الأماكن الصحيحة!
6.يجب وضع كل الشرائح بعيدًا في الصواني المناسبة! تلاميذ لن يترك حتى يتم وضع جميع المواد بصورة صحيحة. أنت فريق!


المعدات المستخدمة في مختبر أمراض الدم | أمراض الدم | مادة الاحياء

توضح النقاط التالية المعدات الرئيسية الثلاثة المستخدمة في مختبر أمراض الدم. المعدات هي: 1. معدات الوزن 2. جهاز طرد مركزي 3. معدل ترسيب كرات الدم الحمراء التلقائي.

1. معدات الوزن:

معدات الوزن ضرورية في المختبر الطبي. يتم استخدامها لوزن المواد لتحضير الكواشف.

أنواع موازين الوزن:

التوازن التحليلي هو في الأساس توازن ثنائي. لديها عملية بسيطة يتم من خلالها إضافة مجموعة من الوزن المعروف في وعاء واحد بينما يتم موازنة المقلاة الأخرى بالمادة التي يتم وزنها. هذا النوع من التوازن يتلاشى بسرعة عند تعديل الميزان.

يتصل أحد طرفي الميزان بعارضة عليها ميزان. قبل وزن مادة ما ، يتم ضبط الميزان على الصفر بمساعدة مقبض في الطرف الآخر من الحزمة. يتم وزن المادة عن طريق تحريك المقياس على الحزمة لتحقيق التوازن. تأخذ هذه الموازين حمولة قصوى تبلغ حوالي 206 جرام مع حساسية 1 مجم.

أدى ظهور المعالجات الدقيقة والخجولة في مجال الإلكترونيات إلى إدخال ميزان إلكتروني شديد الحساسية. يربط هذا النوع من التوازن وزن المادة بالقوة الكهرومغناطيسية. إنه توازن أحادي المقلاة ، مدعوم بملف كهربائي معلق في مجال كهرومغناطيسي.

تؤدي الإضافة إلى التحريك إلى تحريك الملف. تغير هذه الحركة التيار الكهربائي داخل المجال الكهرومغناطيسي. هذا التغيير يتناسب مع وزن المادة ويقاس بنظام مؤشر. الميزان الإلكتروني ، على الرغم من كونه مكلفًا ، يوفر الدقة والسرعة وسهولة التشغيل.

3. ميزان التحميل العلوي للقراءة المباشرة:

هناك نوعان من هذا النوع من الميزان ، كهربائي أو إلكتروني. الكهربائية أقل تكلفة وأكثر قوة. يتمتع الإصداران بنفس مزايا سهولة وسرعة الاستخدام لأن وزن المادة يُرى على مقياس القراءة المباشر ، كما أن لهما أيضًا جهازًا يعوض وزن حاوية الوزن.

رعاية ميزان المختبر:

موازين المختبر هي أدوات دقيقة تتطلب معالجة دقيقة وصيانة دورية. يجب اتباع تعليمات الشركة المصنعة & # 8217s قدر الإمكان.

القواعد البسيطة للعناية بالميزان والحفاظ عليه هي:

1. ضع الميزان على سطح مستوٍ خالٍ من الاهتزازات ، ويفضل أن يكون في منطقة خالية من تيار الهواء.

2. قم بضبط الميزان بمساعدة مستوى الروح عن طريق ضبط البراغي الموجودة على الحامل.

3. صفر الميزان قبل الوزن.

4. استخدم دائمًا الملقط لإضافة أو إزالة الأوزان عند استخدام الميزان.

5. لا تزن أبدًا أي مادة مباشرة على وعاء الميزان ، استخدم ورق الزبدة للوزن.

6. حافظ على الميزان والمقالي خالية من المواد الكيميائية عن طريق تنظيفها بالفرشاة بعد الاستخدام.

7. احتفظ دائمًا بالمجفف داخل الخزانة بميزان تحليلي.

8. تحقق من دقة الميزان بانتظام.

9. عندما لا تكون قيد الاستعمال ، قم بحماية الميزان بغطاء.

2. معدات الطرد المركزي:

تستخدم أجهزة الطرد المركزي لترسيب الجزيئات بسرعة مثل الخلايا ، والتي قد تكون معلقة في سائل. المبدأ هو أن جهاز الطرد المركزي يمارس قوة طرد مركزي (CF) ، وهي أكبر من قوة الجاذبية ، وتسبب الجسيمات في السائل إلى الرواسب.

كلما زاد التليف الكيسي ، كان الترسيب أسرع وأكثر فاعلية. قوة الطرد المركزي هذه ، وهي قوة السحب إلى الخارج بسبب الدوران ، نسبة إلى سرعة الطرد المركزي في عدد دورات في الدقيقة. تحقق الترسيب الفعلي.

نوع أجهزة الطرد المركزي:

في أجهزة الطرد المركزي ذات الرأس الدوار ذات الزاوية الثابتة ، يتم وضع الأكواب أو الأنابيب بزاوية ثابتة. هذا الوضع يجعل عملية الطرد المركزي أسرع من النوع المتأرجح. كما أن هناك فرصة أقل لاضطراب الرواسب عند توقف جهاز الطرد المركزي.

في رأس الدوار المتأرجح للخارج ، تحتل الأكواب أو الأنابيب وضعًا رأسيًا عندما يتحرك جهاز الطرد المركزي ، ولكن يتأرجح للخارج ويصبح أفقيًا. الجسيمات عبارة عن رواسب في قاع الأنبوب. في بعض طرز أجهزة الطرد المركزي ، تتوفر رؤوس دوارة قابلة للتبديل.

أنواع نماذج أجهزة الطرد المركزي:

يتم تثبيت هذا على المقعد ويتم تدوير المقبض يدويًا. يعطي سرعات منخفضة فقط. وهي الآن موجودة في المناطق الريفية في البلدان النامية حيث إمدادات الطاقة الكهربائية غير منتظمة.

2. جهاز طرد مركزي يعمل بالبطارية:

هذا النوع من أجهزة الطرد المركزي مثالي لمنطقة تفتقر إلى الكهرباء المنتظمة. يتطلب الكثير من الطاقة ، لذا ستحتاج البطارية إلى الشحن وإعادة الشحن بشكل منتظم.

3. جهاز طرد مركزي كهربائي:

هذا هو النموذج الأكثر شيوعًا المستخدم في المختبر الطبي وهو متوفر بأحجام ونماذج مختلفة بنطاقات سرعة متفاوتة.

4. أجهزة الطرد المركزي Microhaematocrit:

يستخدم هذا لتدوير الأنابيب الشعرية التي تستخدم للعثور على حجم خلايا الدم الحمراء المكدسة أو لتركيز بعض طفيليات الدم. يمكن أن تكون إما كهربائية أو تعمل بالبطارية. تمتلئ الأنابيب الشعرية بالدم ويتم لفها في جهاز الطرد المركزي. تتم قراءة النسبة المئوية لعمود RBC المملوء باستخدام قارئ haemtocrit. عادة ، يتم ضبط وقت العصر على 3 أو 4 أو 5 دقائق عند 10000 إلى 15000 دورة في الدقيقة باستخدام RCF أو حوالي 14000 جم.

يسمح هذا النوع من أجهزة الطرد المركزي بالتبريد بسرعة أعلى مع حماية العينة من الحرارة الناتجة عن دوارات جهاز الطرد المركزي. تتراوح درجة الحرارة الأساسية لجهاز الطرد المركزي من 15 درجة مئوية إلى 25 درجة مئوية أثناء الطرد المركزي.

الطرد المركزي الخلوي أو السيتوسبين هو جهاز طرد مركزي خاص يستخدم لنقل الخلايا المعلقة إلى منطقة مقيدة على شريحة زجاجية. يركز هذا الجهاز على تعليق الخلية ويقلل من تلف الخلايا.

محللات أمراض الدم:

تستخدم أجهزة تحليل الدم لإجراء اختبارات على عينات الدم. يتم استخدامها في المجال الطبي لإجراء تعداد خلايا الدم البيضاء ، وتعداد الدم الكامل ، وتحليل الخلايا الشبكية ، واختبارات التخثر. هناك أجهزة تحليل لأمراض الدم لدم الإنسان ، وهي مفيدة للمختبرات السريرية ومختبرات الأبحاث.

تختلف الميزات من محلل لأمراض الدم إلى آخر ، مثل اختبار القارورة المغلقة واختبار العينات المفتوح. تسمح بعض أجهزة تحليل الدم للمستخدم باختيار نوع الاختبار المفضل.

الميزات الأخرى التي يجب مراعاتها في محلل أمراض الدم هي حجم العينة المطلوب ، ونوع وكمية أوضاع الاختبار ، والسرعة التي تتوفر بها النتائج ، والترميز التلقائي للنتائج التي تقع خارج النطاق الطبيعي ، وقدرة نتائج الاختبار التي يمكن تخزينها.

3. معدات معدل ترسيب كرات الدم الحمراء الأوتوماتيكية (ESR):

تم التعرف على هذه المعدات لأدائها الفعال والعالي.

يتم تحديد معدل ترسيب كرات الدم الحمراء (ESR) عن طريق القياس بالملليمتر في الساعة ، وانخفضت المسافة بين الخلية الحمراء بعد الانفصال عن البلازما في ماصة رأسية: ماصة معدل الترسيب.

يقدم المحلل الديناميكي التلقائي Esr-30 تقنية الصور والكهرباء. ستقوم بمسح وفحص مواقع الخلايا الحمراء وواجهة بلازما الدم بانتظام ، والتي يتم التحكم فيها تلقائيًا بواسطة الكمبيوتر الصغير. بعد المعالجة بواسطة الكمبيوتر المصغر ، سيتم عرض البيانات مباشرة على شاشة LCD الكبيرة.

يتم استخدامه بشكل أساسي للتعقيم الجاف وتجفيف الأواني الزجاجية وبعض الأدوات المعدنية الأخرى.

العناية والصيانة:

1. لا تنسى تأجيل المفتاح الرئيسي عند انتهاء فترة التسخين.

2. نظف فرن الهواء الساخن بشكل صحيح بعد الاستخدام.

يتم استخدامها لتنمية الكائنات الحية الدقيقة على وسائط استزراع مختلفة ، ويجب أن يتم دعمها وتنظيفها بخجل قبل وبعد الاستخدامات.

يتم استخدامه لإجراء تفاعلات كيميائية مختلفة عند درجة حرارة معينة. حسب متطلبات التجربة.

الرعاية والصيانة:

1. يجب أن يكون الحمام المائي مزودًا بكمية كافية من الماء قبل الاستخدام.

2. لا تنسى تأجيل المفتاح الرئيسي بعد الاستخدام.

3. قم بتغطية الحمام المائي عند عدم استخدامه.

أنا. يستخدم المجهر لدراسة الصور المناسبة والمكبرة والمحددة جيدًا للأشياء ، وهي صغيرة جدًا بحيث لا يمكن ملاحظتها بالعين المجردة.

ثانيا. امسح الأهداف باستخدام قطعة قماش ناعمة بتحريك قطعة القماش.


2.3 أدوات الفحص المجهري

فتح رواد المجهر الأوائل نافذة على العالم غير المرئي للكائنات الحية الدقيقة. لكن الفحص المجهري استمر في التقدم في القرون التي تلت ذلك. في عام 1830 ، ابتكر جوزيف جاكسون ليستر مجهرًا ضوئيًا حديثًا بشكل أساسي. شهد القرن العشرين تطور المجاهر التي استفادت من الضوء غير المرئي ، مثل الفحص المجهري الفلوري ، الذي يستخدم مصدر ضوء فوق بنفسجي ، والمجهر الإلكتروني ، الذي يستخدم أشعة إلكترونية قصيرة الموجة. أدت هذه التطورات إلى تحسينات كبيرة في التكبير والقرار والتباين. بالمقارنة ، كانت المجاهر البدائية نسبيًا لفان ليفينهوك ومعاصريه أقل قوة بكثير حتى من أكثر المجاهر الأساسية المستخدمة اليوم. في هذا القسم ، سنقوم بمسح النطاق الواسع للتكنولوجيا المجهرية الحديثة والتطبيقات الشائعة لكل نوع من أنواع المجهر.

المجهر الضوئي

تندرج العديد من أنواع المجاهر تحت فئة المجاهر الضوئية ، والتي تستخدم الضوء لتصور الصور. تتضمن أمثلة المجاهر الضوئية مجاهر المجال الساطع ، مجاهر المجال المظلم ، مجاهر تباين الطور ، مجاهر تباين التداخل التفاضلي ، مجاهر التألق ، مجاهر ليزر المسح متحد البؤر ، ومجاهر ثنائية الفوتون. يمكن استخدام هذه الأنواع المختلفة من المجاهر الضوئية لتكمل بعضها البعض في التشخيص والبحث.

مجاهر برايتفيلد

مجهر المجال البراق ، ربما يكون أكثر أنواع المجهر استخدامًا ، هو مجهر مركب به عدستان أو أكثر تنتج صورة داكنة على خلفية ساطعة. بعض مجاهر المجال الساطع أحادية العين (لها عدسة واحدة) ، على الرغم من أن معظم مجاهر المجال الساطع الأحدث هي مجهر (لها عدستان) ، مثل المجاهر الموضحة في الشكل 2.12 في كلتا الحالتين ، تحتوي كل عدسة على عدسة تسمى عدسة العين. تقوم العدسات العينية عادة بتكبير الصور 10 مرات (10⨯). في الطرف الآخر من أنبوب الجسم توجد مجموعة من العدسات الموضوعية على قطعة أنف دوارة. عادةً ما يتراوح تكبير هذه العدسات الموضوعية من 4 إلى 100 درجة ، مع تكبير كل عدسة على الغلاف المعدني للعدسة. تعمل العدسات العينية والموضوعية معًا لإنشاء صورة مكبرة. التكبير الكلي هو نتاج تكبير العين مرات التكبير الموضوعي:

على سبيل المثال ، إذا تم تحديد عدسة موضوعية بزاوية 40 درجة وكانت العدسة العينية 10 درجات ، فسيكون التكبير الكلي

العنصر الذي يتم عرضه يسمى عينة. توضع العينة على شريحة زجاجية ، ثم يتم قصها في مكانها على المسرح (منصة) من المجهر. بمجرد تأمين الشريحة ، يتم وضع العينة الموجودة على الشريحة فوق الضوء باستخدام مقابض المرحلة الميكانيكية x-y. تعمل هذه المقابض على تحريك الشريحة على سطح المسرح ، ولكنها لا ترفع أو تنزل المرحلة. بمجرد أن يتم توسيط العينة فوق الضوء ، يمكن رفع موضع المرحلة أو خفضه لتركيز الصورة. يستخدم مقبض التركيز الخشن للحركات واسعة النطاق مع عدسات موضوعية 4⨯ و 10⨯ ، ويستخدم مقبض التركيز الدقيق للحركات صغيرة النطاق ، خاصة مع العدسات الموضوعية 40⨯ أو 100⨯.

عندما يتم تكبير الصور ، فإنها تصبح باهتة نظرًا لوجود ضوء أقل لكل وحدة مساحة من الصورة. لذلك ، تتطلب الصور المكبرة للغاية التي تنتجها المجاهر إضاءة مكثفة. في مجهر المجال الساطع ، يتم توفير هذا الضوء بواسطة جهاز إضاءة ، والذي يكون عادةً مصباحًا عالي الكثافة أسفل المسرح. يمر الضوء المنبعث من خلال العدسة المكثفة (الموجودة أسفل المسرح) ، والتي تركز كل أشعة الضوء على العينة لزيادة الإضاءة إلى أقصى حد. يمكن تحسين موضع المكثف باستخدام مقبض تركيز المكثف المرفق بمجرد تحديد المسافة المثلى ، ولا ينبغي تحريك المكثف لضبط السطوع. إذا كانت هناك حاجة إلى مستويات إضاءة أقل من الحد الأقصى ، يمكن ضبط كمية الضوء التي تضرب العينة بسهولة عن طريق فتح أو إغلاق الحجاب الحاجز بين المكثف والعينة. في بعض الحالات ، يمكن أيضًا ضبط السطوع باستخدام المتغير المتغير ، وهو مفتاح باهتة يتحكم في شدة الإنارة.

ينشئ مجهر المجال الساطع صورة عن طريق توجيه الضوء من المنور في العينة ، ينتقل هذا الضوء أو يمتص أو ينعكس أو ينكسر بشكل تفاضلي بواسطة هياكل مختلفة. يمكن أن تتصرف الألوان المختلفة بشكل مختلف لأنها تتفاعل مع الكروموفور (أصباغ تمتص وتعكس أطوال موجية معينة من الضوء) في أجزاء من العينة. في كثير من الأحيان ، يتم إضافة الكروموفورات بشكل مصطنع إلى العينة باستخدام البقع ، والتي تعمل على زيادة التباين والدقة. بشكل عام ، ستظهر الهياكل في العينة أغمق ، بدرجات مختلفة ، من الخلفية الساطعة ، مما يؤدي إلى إنشاء صور حادة للغاية عند التكبير حتى حوالي 1000 درجة. قد يؤدي التكبير الإضافي إلى إنشاء صورة أكبر ، ولكن بدون زيادة الدقة. هذا يسمح لنا برؤية الأشياء الصغيرة مثل البكتيريا ، والتي تكون مرئية عند حوالي 400 درجة أو نحو ذلك ، ولكن ليس الكائنات الأصغر مثل الفيروسات.

في حالات التكبير العالية جدًا ، قد تتأثر الدقة عندما يمر الضوء عبر كمية صغيرة من الهواء بين العينة والعدسة. ويرجع ذلك إلى الاختلاف الكبير بين مؤشرات الانكسار للهواء والزجاج ، حيث يشتت الهواء أشعة الضوء قبل أن تتمكن العدسة من تركيزها. لحل هذه المشكلة ، يمكن استخدام قطرة زيت لملء الفراغ بين العينة وعدسة الغمر بالزيت ، وهي عدسة خاصة مصممة للاستخدام مع زيوت الغمر. نظرًا لأن الزيت له معامل انكسار مشابه جدًا لمؤشر الزجاج ، فإنه يزيد من أقصى زاوية يمكن للضوء الذي يغادر العينة أن يضرب العدسة عندها. هذا يزيد من الضوء الذي تم جمعه ، وبالتالي دقة الصورة (الشكل 2.13). يمكن استخدام مجموعة متنوعة من الزيوت لأنواع مختلفة من الضوء.

اتصالات مايكرو

صيانة الميكروسكوب: أفضل الممارسات

حتى المجهر القوي جدًا لا يمكنه تقديم صور عالية الدقة إذا لم يتم تنظيفه وصيانته بشكل صحيح. نظرًا لأن العدسات مصممة ومصنعة بعناية لكسر الضوء بدرجة عالية من الدقة ، فحتى العدسات المتسخة قليلاً أو المخدوشة ستكسر الضوء بطرق غير مقصودة ، مما يؤدي إلى تدهور صورة العينة. بالإضافة إلى ذلك ، تعتبر المجاهر أدوات دقيقة إلى حد ما ، ويجب توخي الحذر الشديد لتجنب إتلاف الأجزاء والأسطح. من بين أمور أخرى ، تشمل العناية المناسبة بالمجهر ما يلي:

  • تنظيف العدسات بورق العدسات
  • عدم السماح للعدسات بالاتصال بالشريحة (على سبيل المثال ، عن طريق تغيير التركيز بسرعة)
  • حماية المصباح (إن وجد) من الكسر
  • عدم دفع الهدف إلى الانزلاق
  • عدم استخدام مقبض التركيز البؤري الخشن عند استخدام العدسات الموضوعية 40 درجة أو أكثر
  • فقط باستخدام زيت الغمر مع هدف زيتي متخصص ، وعادة ما يكون هدف 100 درجة
  • تنظيف الزيت من العدسات الغاطسة بعد استخدام المجهر
  • تنظيف أي زيت تم نقله عن طريق الخطأ من عدسات أخرى
  • تغطية المجهر أو وضعه في خزانة عندما لا يكون قيد الاستعمال

ارتباط بالتعلم

قم بزيارة المورد عبر الإنترنت المرتبط أدناه للمحاكاة والعروض التوضيحية التي تتضمن استخدام المجاهر. ضع في اعتبارك أن تنفيذ تقنيات وإجراءات محددة يمكن أن يختلف اعتمادًا على الأداة المحددة التي تستخدمها. وبالتالي ، من المهم التعلم والممارسة باستخدام مجهر حقيقي في بيئة معملية تحت إشراف خبير.

مجهر داركفيلد

مجهر المجال المظلم هو مجهر حقل مشرق يحتوي على تعديل صغير ولكنه مهم للمكثف. يتم وضع قرص صغير معتم (قطره حوالي 1 سم) بين الإنارة وعدسة المكثف. هذا الضوء المعتم ، كما يسمى القرص ، يحجب معظم الضوء من المصباح أثناء مروره عبر المكثف في طريقه إلى العدسة الموضوعية ، مما ينتج عنه مخروط مجوف من الضوء يركز على العينة. الضوء الوحيد الذي يصل إلى الهدف هو الضوء الذي انكسر أو انعكس بواسطة الهياكل في العينة. تظهر الصورة الناتجة عادةً كائنات ساطعة على خلفية داكنة (الشكل 2.14).

غالبًا ما ينتج عن الفحص المجهري Darkfield صورًا عالية التباين وعالية الدقة للعينات دون استخدام البقع ، وهو أمر مفيد بشكل خاص لعرض العينات الحية التي قد يتم قتلها أو تعرضها للخطر بسبب البقع. على سبيل المثال ، اللولبيات الرقيقة مثل اللولبية الشاحبة ، العامل المسبب لمرض الزهري ، يمكن رؤيته بشكل أفضل باستخدام مجهر darkfield (الشكل 2.15).

تأكد من فهمك

التركيز السريري

الجزء 2

يمكن أن تحدث التهابات الجروح مثل عدوى سيندي بسبب أنواع مختلفة من البكتيريا ، يمكن أن ينتشر بعضها بسرعة مع مضاعفات خطيرة. يعد تحديد السبب المحدد أمرًا مهمًا للغاية لاختيار دواء يمكن أن يقتل أو يوقف نمو البكتيريا.

بعد الاتصال بطبيب محلي حول حالة سيندي ، ترسل ممرضة المخيم عينة من الجرح إلى أقرب مختبر طبي. لسوء الحظ ، نظرًا لأن المخيم يقع في منطقة نائية ، فإن أقرب مختبر صغير وسيئ التجهيز. من المحتمل أن يستخدم المختبر الأكثر حداثة طرقًا أخرى لاستنبات البكتيريا ونموها والتعرف عليها ، ولكن في هذه الحالة ، يقرر الفني صنع حامل مبلل من العينة ومشاهدته تحت مجهر حقل مشرق. في التركيب الرطب ، تُضاف قطرة صغيرة من الماء إلى الشريحة ، ويتم وضع زلة غطاء فوق العينة لإبقائها في مكانها قبل وضعها أسفل العدسة الموضوعية.

تحت مجهر المجال الساطع ، بالكاد يستطيع الفني رؤية خلايا البكتيريا لأنها شبه شفافة مقابل الخلفية الساطعة. لزيادة التباين ، يقوم الفني بإدراج توقف ضوئي معتم فوق المصباح. تظهر صورة المجال المظلم الناتجة بوضوح أن خلايا البكتيريا كروية ومجمعة في مجموعات ، مثل العنب.

  • لماذا من المهم تحديد شكل وأنماط نمو الخلايا في العينة؟
  • ما هي أنواع الفحص المجهري الأخرى التي يمكن استخدامها بشكل فعال لعرض هذه العينة؟

انتقل إلى مربع التركيز السريري التالي. ارجع إلى مربع التركيز السريري السابق.

مجاهر تباين الطور

تستخدم مجاهر تباين الطور الانكسار والتداخل الناجم عن الهياكل في العينة لإنشاء صور عالية التباين وعالية الدقة دون تلطيخ. إنه أقدم وأبسط أنواع المجاهر التي تخلق صورة عن طريق تغيير الأطوال الموجية لأشعة الضوء التي تمر عبر العينة. لإنشاء مسارات طول موجة متغيرة ، يتم استخدام نقطة توقف حلقي في المكثف. ينتج عن التوقف الحلقي مخروط مجوف من الضوء يركز على العينة قبل الوصول إلى العدسة الشيئية. يحتوي الهدف على لوحة طور تحتوي على حلقة طور. نتيجة لذلك ، يمر الضوء الذي ينتقل مباشرة من المصباح عبر حلقة الطور بينما ينكسر الضوء أو ينعكس بواسطة العينة عبر اللوحة. يؤدي هذا إلى خروج الموجات التي تنتقل عبر الحلقة بمقدار نصف الطول الموجي تقريبًا عن الطور مع الموجات التي تمر عبر الصفيحة. نظرًا لأن الموجات لها قمم وقيعان ، فيمكنها أن تضيف معًا (إذا كانت في طور معًا) أو تلغي بعضها البعض (إذا كانت خارج الطور). عندما تكون الأطوال الموجية خارج الطور ، فإن قيعان الموجة ستلغي قمم الموجة ، وهو ما يسمى التداخل المدمر. تظهر الهياكل التي تكسر الضوء ثم مظلمة على خلفية ساطعة للضوء غير المنكسر فقط. بشكل عام ، ستختلف الهياكل التي تختلف في الميزات مثل معامل الانكسار في مستويات الظلام (الشكل 2.16).

نظرًا لأنه يزيد من التباين دون الحاجة إلى البقع ، غالبًا ما يستخدم الفحص المجهري على تباين الطور لمراقبة العينات الحية. بعض الهياكل ، مثل العضيات في الخلايا حقيقية النواة والأبواغ في الخلايا بدائية النواة ، يتم تصورها جيدًا بشكل خاص باستخدام الفحص المجهري الطوري (الشكل 2.17).

مجاهر التداخل التفاضلي

مجاهر تباين التداخل التفاضلي (DIC) (المعروفة أيضًا باسم بصريات نومارسكي) تشبه مجاهر تباين الطور من حيث أنها تستخدم أنماط التداخل لتعزيز التباين بين الميزات المختلفة للعينة. في مجهر مدينة دبي للإنترنت ، يتم إنشاء حزمتين من الضوء يختلف فيهما اتجاه حركة الموجة (الاستقطاب). بمجرد أن تمر الحزم عبر العينة أو الفضاء الخالي من العينات ، يتم إعادة تجميعها وتسبب تأثيرات العينات اختلافات في أنماط التداخل الناتجة عن تجميع الحزم. ينتج عن هذا صور عالية التباين للكائنات الحية ذات المظهر ثلاثي الأبعاد. هذه المجاهر مفيدة بشكل خاص في تمييز الهياكل داخل العينات الحية غير الملوثة. (الشكل 2.18)

تأكد من فهمك

مجاهر الإسفار

يستخدم مجهر الفلورة الصبغيات الفلورية المسماة الفلوروكرومات ، والتي تكون قادرة على امتصاص الطاقة من مصدر الضوء ثم انبعاث هذه الطاقة كضوء مرئي. تشتمل الفلوروكرومات على مواد فلورية طبيعية (مثل الكلوروفيل) بالإضافة إلى بقع الفلورسنت التي تضاف إلى العينة لإحداث تباين. تعتبر الأصباغ مثل Texas red و FITC أمثلة على الفلوروكروم. وتشمل الأمثلة الأخرى صبغات الحمض النووي 4 'و 6'-Diamidino-2-phenylindole (DAPI) والبرتقال أكريدين.

ينقل المجهر ضوء الإثارة ، بشكل عام شكل من أشكال الإشعاع الكهرومغناطيسي بطول موجي قصير ، مثل الأشعة فوق البنفسجية أو الضوء الأزرق ، نحو العينة التي تمتص حوامل اللون ضوء الإثارة وتنبعث منها الضوء المرئي بأطوال موجية أطول. ثم يتم تصفية ضوء الإثارة (جزئيًا لأن الأشعة فوق البنفسجية ضارة بالعينين) بحيث يمر الضوء المرئي فقط عبر عدسة العين. ينتج عن هذا صورة للعينة بألوان زاهية على خلفية داكنة.

المجاهر الفلورية مفيدة بشكل خاص في علم الأحياء الدقيقة السريرية. يمكن استخدامها لتحديد مسببات الأمراض ، للعثور على أنواع معينة داخل البيئة ، أو للعثور على مواقع جزيئات وهياكل معينة داخل الخلية. تم أيضًا تطوير مناهج للتمييز بين الخلايا الحية والميتة باستخدام الفحص المجهري الفلوري بناءً على ما إذا كانت تأخذ شكل فلوروكروم معين. في بعض الأحيان ، يتم استخدام الفلوروكروميات المتعددة في نفس العينة لإظهار هياكل أو ميزات مختلفة.

أحد أهم تطبيقات الفحص المجهري الفلوري هو تقنية تسمى التألق المناعي ، والتي تستخدم لتحديد بعض الميكروبات المسببة للأمراض من خلال مراقبة ما إذا كانت الأجسام المضادة مرتبطة بها. (الأجسام المضادة هي جزيئات بروتينية ينتجها الجهاز المناعي وترتبط بمسببات أمراض معينة لقتلها أو تثبيطها.) هناك طريقتان لهذه التقنية: مقايسة التألق المناعي المباشر (DFA) ومقايسة التألق المناعي غير المباشر (IFA). في DFA ، تكون الأجسام المضادة المحددة (على سبيل المثال ، تلك التي تستهدف فيروس داء الكلب) ملطخة بالفلوروكروم. إذا كانت العينة تحتوي على العامل الممرض المستهدف ، فيمكن للمرء أن يلاحظ ارتباط الأجسام المضادة بالعامل الممرض تحت المجهر الفلوري. وهذا ما يسمى بصمة الأجسام المضادة الأولية لأن الأجسام المضادة الملطخة تلتصق مباشرة بالعامل الممرض.

في IFA ، تكون الأجسام المضادة الثانوية ملطخة بالفلوروكروم بدلاً من الأجسام المضادة الأولية. لا ترتبط الأجسام المضادة الثانوية مباشرة بالعوامل الممرضة ، لكنها ترتبط بالأجسام المضادة الأولية. عندما ترتبط الأجسام المضادة الأولية غير الملوثة بالعامل الممرض ، يمكن ملاحظة ارتباط الأجسام المضادة الثانوية الفلورية بالأجسام المضادة الأولية. وبالتالي ، فإن الأجسام المضادة الثانوية ترتبط بشكل غير مباشر بمسببات الأمراض. نظرًا لأن العديد من الأجسام المضادة الثانوية يمكن أن ترتبط غالبًا بجسم مضاد أولي ، فإن IFA يزيد من عدد الأجسام المضادة الفلورية المرتبطة بالعينة ، مما يسهل تصور الميزات في العينة (الشكل 2.19).

تأكد من فهمك

مجاهر متحد البؤر

في حين أن الأشكال الأخرى من الفحص المجهري للضوء تخلق صورة يتم تركيزها إلى أقصى حد على مسافة واحدة من المراقب (العمق ، أو المستوى z) ، يستخدم مجهر متحد البؤر الليزر لمسح عدة مستويات z على التوالي. ينتج عن هذا العديد من الصور ثنائية الأبعاد عالية الدقة على أعماق مختلفة ، والتي يمكن إنشاؤها في صورة ثلاثية الأبعاد بواسطة الكمبيوتر. كما هو الحال مع المجاهر الفلورية ، تستخدم البقع الفلورية بشكل عام لزيادة التباين والدقة. يتم تحسين وضوح الصورة بشكل أكبر من خلال فتحة ضيقة تقضي على أي ضوء ليس من المستوى z. وبالتالي فإن المجاهر متحد البؤر مفيدة جدًا لفحص العينات السميكة مثل الأغشية الحيوية ، والتي يمكن فحصها حية وغير مثبتة (الشكل 2.20).

ارتباط بالتعلم

استكشف عرضًا دوارًا ثلاثي الأبعاد للبيوفيلم كما لوحظ تحت مجهر متحد البؤر. بعد الانتقال إلى صفحة الويب ، انقر فوق الزر "تشغيل" لبدء تشغيل الفيديو.

مجاهر ثنائية الفوتون

في حين أن المجاهر الفلورية الأصلية والمتحد البؤرية سمحت بتصور أفضل للميزات الفريدة في العينات ، لا تزال هناك مشاكل حالت دون التصور الأمثل. كانت الحساسية الفعالة للفحص المجهري الفلوري عند عرض العينات السميكة محدودة بشكل عام بسبب التوهج خارج التركيز ، مما أدى إلى ضعف الدقة. تم تقليل هذا القيد بشكل كبير في المجهر متحد البؤر من خلال استخدام ثقب متحد البؤر لرفض مضان الخلفية خارج التركيز مع أقسام بصرية رقيقة (& lt1 μm) غير واضحة. ومع ذلك ، حتى المجاهر (كنفوكل) تفتقر إلى الدقة اللازمة لعرض عينات الأنسجة السميكة. These problems were resolved with the development of the two-photon microscope , which uses a scanning technique, fluorochromes, and long-wavelength light (such as infrared) to visualize specimens. تعني الطاقة المنخفضة المرتبطة بالضوء ذي الطول الموجي الطويل أن فوتونين يجب أن يضربا موقعًا في نفس الوقت لإثارة الفلوروكروم. تكون الطاقة المنخفضة لضوء الإثارة أقل ضررًا للخلايا ، كما أن الطول الموجي الطويل لضوء الإثارة يخترق بسهولة أكبر في العينات السميكة. وهذا يجعل المجهر ثنائي الفوتون مفيدًا لفحص الخلايا الحية داخل الأنسجة السليمة - شرائح المخ والأجنة والأعضاء الكاملة وحتى الحيوانات بأكملها.

في الوقت الحالي ، يقتصر استخدام المجاهر ثنائية الفوتون على المعامل السريرية والبحثية المتقدمة بسبب ارتفاع تكاليف الأدوات. عادة ما يكلف مجهر واحد ثنائي الفوتون ما بين 300000 دولار و 500000 دولار ، كما أن أشعة الليزر المستخدمة لإثارة الأصباغ المستخدمة في العينات باهظة الثمن أيضًا. ومع ذلك ، مع تحسن التكنولوجيا ، قد تصبح المجاهر ثنائية الفوتون متاحة بسهولة أكبر في البيئات السريرية.

تأكد من فهمك

المجهر الإلكتروني

الحد الأقصى للدقة النظرية للصور التي تم إنشاؤها بواسطة المجاهر الضوئية محدود في النهاية بأطوال موجات الضوء المرئي. Most light microscopes can only magnify 1000⨯, and a few can magnify up to 1500⨯, but this does not begin to approach the magnifying power of an electron microscope (EM), which uses short-wavelength electron beams rather than light to increase magnification and resolution.

يمكن للإلكترونات ، مثل الإشعاع الكهرومغناطيسي ، أن تتصرف كموجات ، ولكن بأطوال موجية تبلغ 0.005 نانومتر ، يمكنها إنتاج دقة أفضل بكثير من الضوء المرئي. يمكن أن تنتج EM صورة حادة يمكن تكبيرها حتى 100000 درجة. Thus, EMs can resolve subcellular structures as well as some molecular structures (e.g., single strands of DNA) however, electron microscopy cannot be used on living material because of the methods needed to prepare the specimens.

There are two basic types of EM: the transmission electron microscope (TEM) and the scanning electron microscope (SEM) (Figure 2.21). يشبه TEM إلى حد ما مجهر الضوء الساطع من حيث الطريقة التي يعمل بها. ومع ذلك ، فإنه يستخدم شعاعًا إلكترونيًا من أعلى العينة يتم تركيزه باستخدام عدسة مغناطيسية (بدلاً من عدسة زجاجية) ويتم عرضه من خلال العينة على كاشف. Electrons pass through the specimen, and then the detector captures the image (Figure 2.22).

لكي تمر الإلكترونات عبر العينة في TEM ، يجب أن تكون العينة رفيعة للغاية (سمكها 20-100 نانومتر). تم إنتاج الصورة بسبب التعتيم المتفاوت في أجزاء مختلفة من العينة. يمكن تعزيز هذا العتامة عن طريق تلطيخ العينة بمواد مثل المعادن الثقيلة ، والتي تكون كثيفة الإلكترون. يتطلب TEM أن تكون الحزمة والعينة في فراغ وأن تكون العينة رفيعة جدًا ومجففة. تتم مناقشة الخطوات المحددة اللازمة لإعداد عينة للمراقبة تحت EM بالتفصيل في القسم التالي.

تشكل SEM صورًا لأسطح العينات ، عادةً من الإلكترونات التي يتم إخراجها من العينات بواسطة حزمة من الإلكترونات. This can create highly detailed images with a three-dimensional appearance that are displayed on a monitor (Figure 2.23). عادة ، يتم تجفيف العينات وتحضيرها بمثبتات تقلل من القطع الأثرية ، مثل الذبول ، التي يمكن إنتاجها عن طريق التجفيف ، قبل أن يتم تغليفها بطبقة رقيقة من المعدن مثل الذهب. Whereas transmission electron microscopy requires very thin sections and allows one to see internal structures such as organelles and the interior of membranes, scanning electron microscopy can be used to view the surfaces of larger objects (such as a pollen grain) as well as the surfaces of very small samples (Figure 2.24). Some EMs can magnify an image up to 2,000,000⨯. 1

تأكد من فهمك

  • ما هي بعض مزايا وعيوب المجهر الإلكتروني ، مقابل الفحص المجهري الضوئي ، لفحص العينات الميكروبيولوجية؟
  • ما هي أفضل أنواع العينات التي يتم فحصها باستخدام TEM؟ SEM؟

Micro Connections

Using Microscopy to Study Biofilms

البيوفيلم عبارة عن مجتمع معقد من نوع واحد أو أكثر من الكائنات الحية الدقيقة ، يتشكل عادةً كطلاء لزج مرتبط بسطح بسبب إنتاج مادة خارج البوليمر (EPS) تلتصق بسطح أو عند السطح البيني بين الأسطح (على سبيل المثال ، بين الهواء و الماء). In nature, biofilms are abundant and frequently occupy complex niches within ecosystems (Figure 2.25). In medicine, biofilms can coat medical devices and exist within the body. نظرًا لامتلاكها خصائص فريدة ، مثل زيادة المقاومة ضد الجهاز المناعي والأدوية المضادة للميكروبات ، فإن الأغشية الحيوية لها أهمية خاصة لعلماء الأحياء الدقيقة والأطباء على حد سواء.

Because biofilms are thick, they cannot be observed very well using light microscopy slicing a biofilm to create a thinner specimen might kill or disturb the microbial community. يوفر الفحص المجهري متحد البؤر صورًا أوضح للأغشية الحيوية لأنه يمكن أن يركز على مستوى z واحد في كل مرة وينتج صورة ثلاثية الأبعاد لعينة سميكة. يمكن أن تساعد الأصباغ الفلورية في تحديد الخلايا داخل المصفوفة. Additionally, techniques such as immunofluorescence and fluorescence in situ hybridization (FISH) , in which fluorescent probes are used to bind to DNA, can be used.

يمكن استخدام المجهر الإلكتروني لمراقبة الأغشية الحيوية ، ولكن فقط بعد تجفيف العينة ، مما يؤدي إلى إنتاج قطع أثرية غير مرغوب فيها وتشويه العينة. In addition to these approaches, it is possible to follow water currents through the shapes (such as cones and mushrooms) of biofilms, using video of the movement of fluorescently coated beads (Figure 2.26).

الفحص المجهري للمسبار

مجهر مسبار المسح لا يستخدم الضوء أو الإلكترونات ، بل يستخدم مجسات حادة للغاية يتم تمريرها فوق سطح العينة وتتفاعل معها مباشرة. ينتج عن ذلك معلومات يمكن تجميعها في صور ذات تكبير يصل إلى 100،000،000 درجة. يمكن استخدام مثل هذه التكبيرات الكبيرة لمراقبة الذرات الفردية على الأسطح. حتى الآن ، تم استخدام هذه التقنيات في المقام الأول للبحث وليس التشخيص.

There are two types of scanning probe microscope: the scanning tunneling microscope (STM) and the atomic force microscope (AFM). يستخدم STM مسبارًا يتم تمريره فوق العينة مباشرة حيث يؤدي انحياز الجهد المستمر إلى إنشاء احتمال لتيار كهربائي بين المسبار والعينة. يحدث هذا التيار عبر نفق الكم للإلكترونات بين المسبار والعينة ، وتعتمد شدة التيار على المسافة بين المسبار والعينة. يتحرك المسبار أفقياً فوق السطح ويتم قياس شدة التيار. يمكن أن يحدد الفحص المجهري النفقي بشكل فعال بنية الأسطح بدقة يمكن من خلالها اكتشاف الذرات الفردية.

على غرار STM ، تمتلك AFM مسبارًا رقيقًا يتم تمريره فوق العينة مباشرةً. ومع ذلك ، بدلاً من قياس التغيرات في التيار عند ارتفاع ثابت فوق العينة ، ينشئ AFM تيارًا ثابتًا ويقيس التغيرات في ارتفاع طرف المجس أثناء مروره فوق العينة. عندما يتم تمرير طرف المجس فوق العينة ، تتسبب القوى بين الذرات (قوى فان دير فال ، والقوى الشعرية ، والترابط الكيميائي ، والقوى الكهروستاتيكية ، وغيرها) في تحريكها لأعلى ولأسفل. Deflection of the probe tip is determined and measured using Hooke’s law of elasticity , and this information is used to construct images of the surface of the specimen with resolution at the atomic level (Figure 2.27).

Figure 2.28, Figure 2.29, and Figure 2.30 summarize the microscopy techniques for light microscopes, electron microscopes, and scanning probe microscopes, respectively.

تأكد من فهمك

  • أيهما ذو تكبير أعلى أم مجهر ضوئي أم مجهر مسبار مسح؟
  • قم بتسمية ميزة واحدة وأحد قيود الفحص المجهري للمسبار.

الحواشي

    “JEM-ARM200F Transmission Electron Microscope,” شركة JEOL USA Inc, http://www.jeolusa.com/PRODUCTS/TransmissionElectronMicroscopes%28TEM%29/200kV/JEM-ARM200F/tabid/663/Default.aspx#195028-specifications. تم الوصول إليه في 8/28/2015.

بصفتنا مشاركًا في Amazon ، فإننا نكسب من عمليات الشراء المؤهلة.

هل تريد الاستشهاد بهذا الكتاب أو مشاركته أو تعديله؟ هذا الكتاب هو Creative Commons Attribution License 4.0 ويجب أن تنسب OpenStax.

    إذا كنت تعيد توزيع هذا الكتاب كله أو جزء منه بتنسيق طباعة ، فيجب عليك تضمين الإسناد التالي في كل صفحة مادية:

  • استخدم المعلومات أدناه لتوليد اقتباس. نوصي باستخدام أداة استشهاد مثل هذه.
    • المؤلفون: نينا باركر ، مارك شنيغورت ، آنه هيو ثي تو ، فيليب ليستر ، بريان إم فورستر
    • الناشر / الموقع الإلكتروني: OpenStax
    • عنوان الكتاب: Microbiology
    • تاريخ النشر: 1 نوفمبر 2016
    • المكان: هيوستن ، تكساس
    • عنوان URL للكتاب: https://openstax.org/books/microbiology/pages/1-introduction
    • Section URL: https://openstax.org/books/microbiology/pages/2-3-instruments-of-microscopy

    © أغسطس 20 ، 2020 OpenStax. محتوى الكتاب المدرسي الذي تنتجه OpenStax مرخص بموجب ترخيص Creative Commons Attribution License 4.0. لا يخضع اسم OpenStax وشعار OpenStax وأغلفة كتب OpenStax واسم OpenStax CNX وشعار OpenStax CNX لترخيص المشاع الإبداعي ولا يجوز إعادة إنتاجه دون الحصول على موافقة كتابية مسبقة وصريحة من جامعة رايس.